Объявление

Свернуть
Пока нет объявлений.

Помогите найти питательную среду для нейронов

Свернуть
X
  • Фильтр
  • Время
  • Показать
Очистить всё
новые сообщения

  • Помогите найти питательную среду для нейронов

    Здравствуйте. Не могли бы вы подсказать какую питательную среду лучше использовать для поддержания жизни нейронов. Заранее спасибо.

  • #2
    Re: Помогите найти питательную среду для нейронов

    https://www.google.com/#q=neuronal+d...evid=390639032

    Используйте полную среду Игла и 15% фетальной сыворотки КРС, НО!!! Не забывайте, что первичная культура может быть источником лизогенной вирусной инфекции, а культуру полученную из Национального банка клеточных линий и гибридом, лучше растить на той среде, на которой Вам "раскачивали" линию.

    Посмотрите Санитарные Правила для 3-, 4- групп микроорганизмов, их писал Онищенко, т.е. "обжалованию не подлежит".
    Последний раз редактировалось VladimirKox; 30.05.2014, 05:51 PM.

    Комментарий


    • #3
      Re: Помогите найти питательную среду для нейронов

      Если Вы под "нейронами" имели в виду срезы мозга (например, гиппокампа), то в качестве питательной среды используется стандартная искусственная спинномозговая жидкость - artificial cerebrospinal fluid (aCSF), насыщенная карбогеном (http://ru.wikipedia.org/wiki/Карбоген). Состав aCSF, используемой для мышей, приведён в прикрепленной таблице. Карбоген: 95% кислорода, 5% углекислого газа.

      aCSF_composition.png
      Последний раз редактировалось Alex5; 30.05.2014, 08:48 PM.

      Комментарий


      • #4
        Re: Помогите найти питательную среду для нейронов

        Не могли бы вы подсказать какую питательную среду
        Питательная среда вобще-то отличается от физ.раствора, там - аминокислоты присутствуют http://www.sigmaaldrich.com/life-sci...ons/basal.html

        Alex5! Как долго живут срезы в физ.растворе?

        Комментарий


        • #5
          Re: Помогите найти питательную среду для нейронов

          > Как долго живут срезы в физ.растворе?

          В aCSF срезы гиппокампа (толщина 400 микрон) живут не менее 5-8 часов, этого времени достаточно для электрофизиологических измерений (patch clamp). Это с учётом того, что лабораторные условия не стерильные. В стерильных условиях можно говорить о десятках часов, при этом качество приготовления срезов имеет значение. Для нейрональных культур питательная среда, естественно, другая. Без знания специфики эксперимента, серьёзное обсуждение состава питательной среды для нейронов бессмысленно.
          Последний раз редактировалось Alex5; 01.06.2014, 09:20 PM.

          Комментарий


          • #6
            Re: Помогите найти питательную среду для нейронов

            Это с учётом того, что лабораторные условия не стерильные.
            Там ещё раневой детрит может что-то делать.
            Без знания специфики эксперимента, серьёзное обсуждение состава питательной среды для нейронов бессмысленно.
            Золотые слова. А если всерьез культивировать - стажировка под присмотром вирусолога.

            Комментарий


            • #7
              Re: Помогите найти питательную среду для нейронов

              Для первичной культуры нейронов сейчас обычно используют Neurobasal medium с добавлением B-27 (Invitrogen). Если используются растворы с сывороткой, то, во-первых, нужна очень высокая плотность посадки, чтобы культура жила, во-вторых, необходимо ингибировать размножение астроцитов.

              Не забывайте, что первичная культура может быть источником лизогенной вирусной инфекции
              VladimirKox , не могли бы Вы уточнить, откуда сия информация? Несколько лет подряд культивирую нейроны, про такое первый раз слышу :-(

              Нейроны в основном не размножаются, поэтому, насколько я знаю, как таковых "линий" не существует. Есть линии нейробластом, но их свойства достаточно далеки от культур нейронов, хотя для некоторых задач их используют. Также видела, что продаются замороженные суспензии первичных нейрональных культур, но сама с ними не работала.

              Насчет aCSF согласна, для срезов самое то.

              Комментарий


              • #8
                Re: Помогите найти питательную среду для нейронов

                VladimirKox , не могли бы Вы уточнить, откуда сия информация? Несколько лет подряд культивирую нейроны, про такое первый раз слышу :-(
                https://www.google.com/search?client...BB%D0%BE%D0%B5

                Линии коллекций специально проверяются на отсутствие вирусов.
                http://www.cytspb.rssi.ru/rkkk/rkkk_ru.htm

                Нейроны в основном не размножаются, поэтому, насколько я знаю, как таковых "линий" не существует.
                Чуть выше я давал ссылку на протоколы дифференцировки в нейроны из стволовых клеток. А так - да, нейроны не делятся.

                Насчет aCSF согласна, для срезов самое то.
                Опять же, смотря сколько собираются культивировать срез.Distributed processing in cultured neuronal networks.pdf
                Последний раз редактировалось VladimirKox; 02.06.2014, 02:33 PM.

                Комментарий


                • #9
                  Re: Помогите найти питательную среду для нейронов

                  Интересно, omega3-6-9 еще с нами? Прям интересно, что ж ему надо :-) А то мы уже начинаем вирусы культивировать в дифференцированных из стволовых клеток нейронах, встроенных в органотипические срезы...

                  Комментарий

                  Обработка...
                  X